步入法
步入法(stepthroughtest)测定小鼠学习和记忆功能的实验方法。国内外的有关研究机构常用由深色有机玻璃板组成的实验箱(分明箱和暗箱两部分)做实验。暗箱为20.0×20.0×30.0立方厘米,底部铺以间距为1.0厘米的铜栅,必要时可以通电,箱体底部的正前方有一个直径为4.0厘米的门洞,洞的下方有一块向箱体外延伸的8.5×3.5平方厘米的小板,门洞的侧面设一扇能开启和关闭的门,门洞的前上方设一盏60瓦的白炽灯,灯亮时形成明区,而箱体内部为暗区。实验时,将小鼠背向门洞置于箱体外的小板上,记录它步入暗箱内的潜伏期。 小鼠一进入暗箱,立即将门洞关闭,并给予0.3毫安~0.4毫安的电击,时间为3秒钟。电击结束,将小鼠放回饲养笼。以后的某一时刻(通常在训练后24小时),再将小鼠背向开启的门洞,置于小板上进行测查。它如进入暗箱,门洞不再关闭,但暗箱底部通电。观察并记录小鼠在5分钟之内步入暗箱的潜伏期和错误次数。 潜伏期的长短、错误次数的多少和错误动物所占百分比的大小,为评价动物记忆好坏的指标。在正常情况下,动物一直站立在木板上,不再进入暗箱。中国医学科学院药物研究所研制的实验箱由微机控制,可同时观察并自动记录5只小鼠的行为活动,不但提高了工作效率,也保证了实验的精确性。该方法的优点是操作简便,训练快,为一次性的被动回避反应,特别是便于筛选促智药物。不过,与步下法相同,缺点是电刺激可使实验动物有不同程度的应激反应。